Zlecenie 7034513 - Usługa wyprowadzenia stabilnej linii komórkowej (Zapytanie...

wadzenia stabilnej linii komórkowej Sp2/0 wytwarzającej przeciwciało biopodobne do Cetuximab. Cel zamówienia Celem zamówienia jest wykonanie usługi polegającej na wyprowadzeniu stabilnej linii komórkowej Sp2/0 wytwarzającej przeciwciało biopodobne do Cetuximab. Przedmiot zamówienia 1. Opis przedmiotu zamówienia:
Przedmiotem zamówienia jest usługa wyprowadzenia stabilnej linii komórkowej Sp2/0 wytwarzającej przeciwciało biopodobne do Cetuximab. Usługa powinna zawierać opracowanie konstruktu genetycznego, wprowadzenie go do komórek gospodarza oraz uzyskanie wysokoproduktywnego stabilnego klonu komórkowego (stężenie białka >2 g/L) wytwarzającego przeciwciało o pożądanych cechach jakościowych.
2. W ramach zamówienia Wykonawca jest zobligowany dostarczyć Zamawiającemu:
a. Banki 10 klonów komórkowych (po 50 jednorodnych fiolek banku każdego klonu), wybranych przez Zamawiającego na podstawie wyników dla wszystkich dostępnych klonów komórkowych i rekomendacji Wykonawcy z:
• co najmniej 1 analizy ilościowej - określającej produktywność klonu;
• co najmniej 3 analiz jakościowych – określających: tożsamość białka, modyfikacje posttranslacyjne (profil glikozylacji przeciwciała obejmujący co najmniej ilościową identyfikację glikoform G0F, G1F, G2F, G1, G0, Man5, G2F+Sia, G2F+2Sia, G2F+2Gal), poziom oksydacji, deamidacji, profil kwasowo-zasadowy;
• co najmniej 1 analizy aktywności - test proliferacji.
 wybór oraz status zaproponowanych przez Wykonawcę metod analitycznych powinien zostać zaakceptowany przez Zlecającego przed rozpoczęciem projektu
 wraz z bankami komórkowymi Wykonawca przekaże Zamawiającemu raport
z przygotowania banków komórkowych oraz raport potwierdzający weryfikację jakości banków obejmujący co najmniej charakterystykę tempa wzrostu, czasu podziałów, analizę izoenzymów i czystości mikrobiologicznej pod kątem obecności Mycoplasma oraz zanieczyszczeń wirusowych zgodnie z wytycznymi FDA 2010 Guidance for Industry, FDA 1997 Points to Consider oraz ICH Q5A (R1). Wyniki zostaną zaprezentowane dla co najmniej 3 fiolek banku każdego klonu.
 Wyniki z badania stabilności wyselekcjonowanych klonów przez co najmniej 80 podwojeń (na poziomie stabilnej produkcji białka i stabilności genetycznej)
b. 50 banków puli komórek „pools of mock-transfected cell clone”, które nie zostały poddane selekcji klonalnej, ale została potwierdzona ich stabilność (weryfikacja obecności wprowadzonego konstruktu po co najmniej 30 pasażach komórek. Dopuszcza się możliwość weryfikacji za pomocą sekwencjonowania DNA, PCR względem specyficznej sekwencji w ramach plazmidu, oporność na czynnik selekcyjny)