Zlecenie 7086109 - WYKONANIE KOMPLEKSOWEJ USŁUGI BADAWCZEJ – DOTYCZY BADAŃ...

dkliniczne). Cel zamówienia Zamawiający przeprowadza niniejsze postępowanie na potrzeby wyłonienia wykonawcy kompleksowych usług badawczych (badania przedkliniczne), które będą przedmiotem wniosku o dofinansowanie planowanego do złożenia w odpowiedzi na konkurs nr 6/1.1.1./2019 w ramach Szybkiej Ścieżki Programu Operacyjnego Inteligentny Rozwój, współfinansowanego ze środków Unii Europejskiej w ramach Europejskiego Funduszu Rozwoju Regionalnego. Przedmiot zamówienia Realizacja kompleksowej usługi badawczej:
A. Dostęp do pomieszczeń hodowlanych i doświadczalnych (ilość klatek na ok. 120 sztuk myszy z hodowlą) wraz z wszystkimi czynnościami związanymi z hodowlą zwierząt i przygotowaniem ich do eksperymentu przedklinicznego na modelu mysim choroby Huntingtona YAC128 (karma, ściółka, wymiana klatek, rozmnażanie, oznaczanie, genotypowanie, utylizacja). Laboratorium o standardach adekwatnych do GLP.
B. Przygotowanie grupy (stada) zwierząt do eksperymentu (70 samców heterozygotycznych YAC128 do iniekcji stereotaktycznej oraz 20 samców kontrolnych FVB - wt littermate) oraz wykonanie analiz:
1. iniekcje stereotaktyczne domózgowe wektorów AAV (ok. 70-80 iniekcji),
2. perfuzja myszy (45 myszy)
3. przygotowanie skrawków mózgu na kriostacie (90 myszy)
4. izolacja DNA, RNA i białka (90 myszy)
5. odwrotna transkrypcja, PCR w czasie rzeczywistym
6. Analizy poziomu białka metodą western blot (huntingtyna, plectyna)
7. Badania immunohistochemiczne (markery neuronalne (NeuN), astrocyty (GFAP), microglej (Iba-1) oraz DARPP-32)
8. Wykonanie 3 testów behawioralnych: Intelii Cage, rotarod, PhenoMaster z systemem ActiMot2
a) 10 –tydzień (40 osobników)
b) 15 tydzień (40 osobników)
c) 25 tydzień (40 osobników)
d) 35 tydz. (60 osobników)
e) 45 tydz. (60 osobników)
f) 60 tydz. (30 osobników)
9. Wykonanie podstawowych badań biochemicznych z krwi myszy (ok. 40 analiz)